在蛋白質、多肽等高分子物質純化實驗中，您是否面臨以下挑戰？
●分辨率不足：目標產物與雜質難以徹底分離
●成本高昂：層析介質壽命短、重復利用率低
●操作繁瑣：脫鹽、緩沖液置換耗時費力
海普新材料推出的葡聚糖凝膠G系列產品，憑借其均一的孔徑分布和良好的親水性，成為了科研和工業生產的理想選擇，助您實現對不同分子量生物大分子 “高分辨率+低成本”的分離！
葡聚糖凝膠簡介
葡聚糖凝膠屬于軟性凝膠，是一類具有多孔性三維空間網狀結構的高分子化合物。其內部微孔具備較強的溶劑吸納能力，可吸收大量溶劑，且凝膠的孔隙度與所吸收溶劑的體積呈現出一定比例關系。憑借其獨特的分子架構與物化特性，葡聚糖凝膠不僅展現出高效的分離純化能力，而且穩定性好，被廣泛應用于蛋白質、多肽、核酸、酶以及多糖等高分子物質的分離純化，同時在除鹽、干燥、分析等方面也發揮著重要作用。
葡聚糖凝膠的基本原理
1.分子篩效應
葡聚糖凝膠柱層析是一種基于分子篩效應的分離技術。其原理是利用葡聚糖凝膠特有的三維交聯網狀結構，依據分子大小差異實現分離。葡聚糖凝膠具有特定的排阻極限和分配系數，凝膠排阻極限決定可分離的最大分子尺寸，分配系數反映分子在凝膠內部孔隙和外部流動相之間的分配比例。
當含有不同大小分子的樣品溶液流經葡聚糖凝膠柱時：
· 大分子（>排阻極限）：無法進入凝膠孔隙，沿顆粒間隙快速洗脫；
· 小分子：自由擴散至凝膠孔隙，路徑長、保留時間長，最后洗脫；
· 中等分子：部分進入孔隙，洗脫順序介于兩者間。
凝膠過濾層析分離原理
葡聚糖凝膠的網孔大小不同，導致不同大小的分子在凝膠中的擴散速度不同。大分子擴散慢，小分子擴散快，擴散速率的差異導致洗脫順序不同，根據洗脫順序的不同，可以實現不同分子大小樣品的分離。
葡聚糖凝膠填料產品
不同規格型號的葡聚糖凝膠用英文字母G表示，G后面的阿拉伯數為凝膠得水值的10倍。例如，葡聚糖凝膠G-25為每克凝膠膨脹時吸水2.5mL。依次有G-10、G-15、G-25、G-50等型號。
不同規格可以通過交聯劑當量和交聯次數來控制。交聯度增大時，即交聯劑用量增多或交聯次數增加時，凝膠內部網狀結構更致密，吸水膨脹程度減小，網孔變小，僅允許小分子化合物通過，適用于小分子分離。反之，交聯度減小時，網狀結構變疏松，吸水膨脹程度增大，網孔變大，可容納大分子化合物通過，適合大分子分離。
2.吸附與解析
樣品中的各組分在葡聚糖凝膠上的吸附能力不同，通過選擇合適的洗脫液，可以實現各組分的分離。
不同型號葡聚糖凝膠的分離范圍和主要用途：
基于上述原理，不同型號的葡聚糖凝膠產品，可以對應不同分子量范圍的化合物分離需求。
值得注意的是，線性分子（多糖/DNA）應選擇比標準分子量低1.5–2倍的型號（如分離10kDa多糖用G-50，但實際表現可能類似5kDa球狀蛋白）。柔性多肽需降低1個型號（如5kDa松散多肽用G-25而非G-50）。
葡聚糖凝膠G-10
葡聚糖凝膠G-10是性能良好的凝膠過濾填料。在G系列中交聯度最高，孔徑小且親水，適合分子量小于700 Da生物分子的分離純化，尤其適用于脫鹽及多肽等小分子的分離。
【注】
Ⅰ.因流速極慢，需低壓操作或長柱床（>30cm）。
Ⅱ.避免用于疏水性分子（可能吸附）。
葡聚糖凝膠G-15
葡聚糖凝膠G-15交聯度較高，具有孔徑較小和親水的特點，適合生物分子的分離純化，分離范圍在分子量＜1500Da，適用于脫鹽、多肽與其它小分子的分離等。
【注】線性分子（如DNA引物）的實際分離上限可能僅1kDa。
葡聚糖凝膠G-25
葡聚糖凝膠G-25在工業上有著重要用途。它主要用于分離分子量在1500 – 5000Da范圍的物質，尤其適用于多肽與其它小分子的分離。此外，G-25還常用于工業中的脫鹽和緩沖液置換操作。
【注】
Ⅰ.對接近5kDa的分子可能分辨率不足，需換G-50。
Ⅱ.避免用于易聚集蛋白質（高流速可能引發沉淀）。
葡聚糖凝膠G-50
葡聚糖凝膠G-50是一種經典的凝膠過濾填料，G-50交聯度中等，具有多孔和親水的特點，適合生物分子的分離純化。主要用于分離在分子量1500~30000Da范圍的物質，適用于蛋白的純化、脫鹽和分子量的測定等。
【注】
Ⅰ.多糖因高水合體積，分離上限可能僅15–20kDa。
Ⅱ.需優化柱床高度（建議20–50cm）以提高分辨率。
3.葡聚糖凝膠分離純化操作示范
以葡聚糖凝膠G-25為例
01預處理
溶脹：稱取25g葡聚糖凝膠G-25于500mL燒杯中，加入去離子水室溫下 溶脹48h，倒掉上部懸浮的細小顆粒。
脫氣：去離子水煮沸1h以去除凝膠內部空氣。
02裝柱與平衡
將層析柱內部清洗干凈，在柱體中加入適量去離子水，將處理好 的凝膠攪勻，緩緩傾入柱體（柱口徑1 cm）。沉降后，凝膠加入總量應達約9cm高。實驗開始時，用對應的洗脫液（一般為PBS緩沖鹽和氯化鈉溶液）平衡約2個柱體積，始終保證凝膠柱面上留有一定高度的洗脫液，避免風干或進入空氣。
03加樣與洗脫
打開下端出水口，使液面下降，當液面與凝膠面相切時關閉下端出水口。將已配好的樣品溶液（一般為水溶液或者PBS溶液）輕輕滴在凝膠柱上表面，打開底端出口流出固定體積的洗脫液，使樣品下降至與凝膠面相切。然后在柱內加入適量洗脫液，確保樣品完全進入層析柱，關閉下端出水口，靜置24h以上。
04收集與測定
用合適的洗脫劑洗脫，收集樣品并逐一檢測合并。
?影響因素：層析柱的選擇與裝填、流動相（洗脫液）的選擇、加樣量等都會影響葡聚糖凝膠柱層析的效果。
?再生方法?：可以使用NaOH(0.2M)和NaCl(0.5M)混合液處理進行再生。
海普新材料的葡聚糖凝膠G系列產品，為蛋白質、多肽、核酸、酶以及多糖等高分子的分離純化，以及在樣品除鹽、干燥、分析等方面，提供有力支持。若您在實驗和生產過程中遇到相關問題，歡迎掃描文末二維碼聯系我們，我們將為您推薦解決方案！
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